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abm脂质体转染试剂实验操作注意事项说明

2024-04-19

在现代分子生物学和遗传工程领域,脂质体转染试剂作为一种高效的基因递送工具,对于基因表达研究、蛋白质功能分析以及新型药物的开发具有重要意义。本文将详细介绍脂质体转染试剂的原理、应用以及在实验操作中的注意事项。

 

脂质体转染试剂的原理

脂质体转染试剂主要由阳离子脂质体构成,这些脂质体能够与带负电荷的核酸分子(如DNARNA)通过静电作用力结合,形成脂质-核酸复合物。这种复合物可以与细胞膜发生融合或内吞,将核酸分子有效地传递到细胞内部,实现外源基因的表达。

 

脂质体转染试剂的应用

1. 基因表达分析:通过转染含有特定基因的质粒DNA,研究基因的功能和表达调控。

2. 蛋白质功能研究:转染编码特定蛋白质的基因,分析蛋白质在细胞内的定位、稳定性和相互作用。

3. 药物筛选:利用转染技术构建稳定表达特定基因的细胞系,用于高通量药物筛选。

4. 基因治疗:作为基因治疗的载体,将治疗性基因传递到患者体内,治疗遗传性疾病或癌症。

5. RNA干扰:转染小干扰RNA(siRNA)或微小RNA(microRNA),研究基因沉默或调控基因表达。

 

实验操作中的注意事项

1. 细胞状态:选择健康、生长状态良好的细胞进行转染,以提高转染效率。

2. 转染试剂的选择:根据实验目的和细胞类型,选择合适的脂质体转染试剂。

3. 复合物形成:核酸与脂质体混合时,避免过度涡旋,以免产生过多的气泡。

4. 转染后处理:转染后适当时间更换培养基,去除未转染的脂质体和核酸复合物。

5. 毒性评估:监测脂质体转染试剂对细胞的毒性,优化转染条件,减少细胞损伤。

 

艾美捷脂质体转染试剂ABS-G2500是一种新型的阳离子脂质体转染试剂,毒性低,转染效率高。对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率。

 

脂质体转染试剂应用:

1、非常适合悬浮细胞(左图)

2、倍更高的表达式(右图)

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左图:abmSusfectin?转染试剂可以高效转染悬浮细胞。使用Susfectin?转染试剂(目录号G4000),用乱序siRNA-GFP慢载体(目录号LV015-G)转染HEK293悬浮细胞。

右图:与PEI相比,Susfectin?的表达高出2倍。使用竞争转染试剂Susfectin TM(目录号G4000)或线性PEI转染CHO细胞。使用ELISA定量上清液中的重组抗体水平。

 

abm的脂质体转染试剂是特别配制的,用于将DNA转染到真核悬浮细胞中,而无需去除血清/培养基。这种简化的工作流程使Susfectin成为转染CHO293细胞的Z佳选择。