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PureCol,牛去端胶原溶液的用途说明及保存条件

2024-02-18

PureCol 牛去端胶原溶液是一种 3 mg/ml I 型牛去端肽胶原溶液,用于 2D 和 3D 细胞培养,或作为胶原蛋白标准品。 PureCol 被誉为胶原蛋白产品纯度(≥99.9% 胶原蛋白含量)、一致性和可重复性的标准,并在超过 2000 种出版物中被引用。 PureCol 胶原蛋白大约 97% 为 型去端胶原,其余为 III 型胶原蛋白。 PureCol 胶原蛋白的浓度约为 3 mg/ml。每个特定批次的浓度均在购买每个产品时提供的分析证书上提供。 PureCol 是可溶于 0.01 N HCl 的去端肽胶原,因此 pH 值为 2PureCol 胶原蛋白非常适合表面涂层、为培养细胞提供薄层准备或用作固体凝胶。 PureCol 胶原蛋白采用用户友好型包装,便于使用和储存。 PureCol 经过无菌过滤,作为即用型溶液提供。

 

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艾美捷PureCol,牛去端胶原溶液ABM-5005-100ML储存/稳定性:

储存在2-10摄氏度,并在冷冻胶冻包装上发货。请勿冷冻。产品标签和每个特定批次的分析证书上列有有效期。产品在按照指示处理和储存时适用有效期。注意事项和免责声明:本品仅用于研究和开发,不适用于人类或其他用途。请参阅有关危害和安全操作规程的物质安全数据表。

 

涂层步骤注意事项:请将以下建议作为指导,确定您培养系统的合适涂层条件。

1. 从瓶中取出所需量的胶原蛋白,倒入稀释容器中。

2. PureCol®稀释至约50100 μg/ml~1:30)的水中。也可使用0.01 N盐酸溶液。

3. 轻轻搅拌混合物,直至完全混合。

4. 向培养表面添加适量稀释的PureCol®物质,确保整个表面都被涂层。

5. 在室温下盖上盖子孵育1-2小时。吸去任何剩余物质。或者,直到表面干燥为止,也可在室温下孵育。

6. 用无菌培养基或PBS小心冲洗涂层表面,避免划伤表面。

7. 涂层表面已准备就绪,也可在2-10°C潮湿或风干存放,如果保持无菌性。

三维凝胶制备步骤

1. 缓慢地将1份冷却的10PBS10倍培养基加入8份冷却的胶原溶液中,轻轻搅拌。

2. 使用无菌0.1 M氢氧化钠将混合物的pH调整至7.0-7.5。仔细监控pH调整(pH计、酚红或pH试纸)。

3. 用无菌水调整最终体积至总共10份。

4. 为防止凝胶化,保持混合物的温度在2-10摄氏度。

5. 为形成凝胶,加热至37摄氏度。允许大约90120分钟形成凝胶。

 

PureCol,牛去端胶原溶液部分文献参考:

1. Tanzer, M. L., Cross-linking of collagen. Science, 180(86), 561-566 (1973).

2. Bornstein, P., and Sage, H., Structurally distinct collagen types. Ann. Rev. Biochem., 49, 957-1003 (1980).

3. Tomasek, J.J., and Hay, E.D., Analysis of the role of microfilaments in acquisition and bipolarity and elongation of fibroblasts in hydrated collagen gels. J. Cell Biol., 99, 536-549 (1984).

4. Roeder, B.A., et al., Tensile mechanical properties of three-dimensional type I collagen extracellular matrices with varied microstructure. J. Biomech. Eng., 124, 214-222 (2002).

5. Sato, M., et al., 3-D Structure of extracellular matrix regulates gene expression in cultured hepatic stellate cells to induce process elongation. Comp Hepatol., Jan 14;3 Suppl 1:S4 (2004).

6. Li, G.N., et al., Genomic and morphological changes in neuroblastoma cells in response to three-dimensional matrices. Tissue Eng., 13, 1035-1047 (2007).

7. Karamichos, D., et al., Regulation of corneal fibroblast morphology and collagen reorganization by extracellular matrix mechanical properties. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 48, 5030-5037 (2007).

8. Wozniak, M.A., and Keely, P.J., Use of three-dimensional collagen gels to study mechanotransduction in T47D breast epithelial cells. Biol. Proced. Online, 7, 144-161 (2005).