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Advanced BioMatrix-ECM Select 阵列套件Ultra-36解决方案

2024-02-06

ECM Select Array Kit Ultra-36是一种细胞外基质筛选阵列,包含一片功能化了专有水凝胶的显微镜玻璃载玻片。36种细胞外基质(ECM)条件被印刷成阵列点位,全部来自人源。每个点位直径为400微米,以9个复制品的形式印刷(图1)。ECM被局限在每个点位内,不与相邻点位交叉扩散,因此每个点位代表一个独立的“孔”或实验。哺乳动物细胞在体内存在着影响其行为(增殖、分化、死亡等)和功能的独特微环境。在体外培养细胞时,必须重现这种微环境以实现生理相关的生长。在影响细胞在体内行为的众多因素中,细胞外基质(ECM)在确定细胞功能方面起着重要作用。目前,寻找适用于细胞培养的合适ECM是一个试错过程,需要大量的细胞以及显著的时间和成本投入。ECM Select Array Kit Ultra-36允许以较少的细胞数量在短时间内并行筛选36ECMECM组合。感兴趣的细胞被接种到带有4个培养腔的载玻片上(附带提供),并在孵育箱中培养所需的时间。可以使用亮场显微镜观察细胞形态、附着和生长。通过使用特定荧光标记物对载玻片上的细胞进行染色,可以监测特定的细胞行为。荧光信号可以通过荧光显微镜成像系统进行检测。

 

与在多孔组织培养板中执行相同实验相比,艾美捷Advanced BioMatrix ECM Select Array Kit Ultra-36使用简单。细胞接种、固定、洗涤和处理步骤都在一个单一的溶液交换中完成,消除了多孔板处理的步骤。对于大多数细胞类型,从开始到结束,确定适用于培养细胞的合适ECM可以在不到24小时内完成。

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ECM Select 阵列套件 Ultra-36参数说明:

注意事项和免责声明本品仅供研究和开发使用,不适用于人体或其他用途。

存储、保质期和稳定性ECM Select Ultra Array Kit的保质期在-10-30°C下至少为12个月。保质期测试正在进行中。不建议重复冻结和解冻,但有限的冻结和解冻似乎对产品没有负面影响。不建议在更低的温度下存储。

根据我们的稳定性研究,ECM Select Ultra Array Kit28°C下储存3-4天时表现良好。然而,经过2周在28°C下储存后,一些细胞外基质条件的细胞附着能力会降低。在28°C下储存1个月后,载玻片上几乎所有的ECM条件都失去了细胞附着能力。

 

操作步骤将细胞接种到载玻片上:

1. 准备250,000个所需的细胞,用5毫升完整的培养基(细胞密度为50,000个细胞/毫升)。

2. -20°C的冷冻机中取出ECM Select Ultra Array Kit,放在无菌层流罩下。打开铝箔袋,取出铝箔袋中的内容。首先,将培养皿从塑料袋中取出并取下盖子。然后打开载玻片架上的盖子,轻轻将载玻片从载玻片架上取下。将载玻片放入培养皿的一个腔中。在取下载玻片时要小心,使用无菌技术,如戴无菌手套或使用无菌镊子,并且只触摸载玻片的边缘。确保印刷的斑点面朝上(载玻片上的数字和字母应清晰可见)。

3. 在载玻片上加入5毫升无菌磷酸盐缓冲液(PBS)。确保整个载玻片浸没在PBS溶液中,并避免在载玻片下方困住气泡。轻轻摇晃载玻片几次,然后吸去PBS溶液。不要触摸载玻片表面。

4. 加入5毫升所需的培养基(与培养细胞相同的培养基),确保整个载玻片浸没在培养基中。轻轻摇晃载玻片几次,然后吸去培养基溶液。不要触摸载玻片表面。

5. 轻轻振动移液器,简短地将准备好的250,000个细胞上下吸取,并立即将细胞直接加到载玻片上。在分配细胞时,通过来回移动移液器来均匀分布细胞。不要触摸载玻片表面。将盖子盖回培养皿上。

6. 小心地将含有载玻片的4孔培养皿转移到孵育箱中,在37°C5% CO2下培养细胞过夜(最少12小时以确保高效的细胞附着,最多3天)。

 

注意事项:当从载玻片架上取下载玻片时,载玻片表面可能可见阵列斑点。用PBS/培养基洗涤后,这些斑点可能会消失。这是正常的,不会影响ECM阵列的性能。

 

注意事项:对于细胞系,12小时应足够观察到细胞附着。对于从组织中新鲜分离的细胞或之前冻存的细胞,可能需要多达2天才能观察到显著的细胞附着。

 

注意事项:如果需要进行细胞增殖研究,请减少细胞数量,以便在斑点上留出额外的空间供细胞分裂。建议根据细胞的大小和形态,从100,000-150,000个细胞开始。细胞越大,所需细胞数量越少。

 

美国Advanced BioMatrix3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者,在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。